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2024/1/30
【生分解性プラスチック】東京大学／海洋研究開発機構／群馬大学／製品評価技術基盤機構／産業技術総合研究所／日本バイオプラスチック協会、深海分解を実証。プラスチック海洋汚染問題の解決に光明
発表のポイント
▶さまざまな生分解性プラスチック（ポリ乳酸を除く）が、水深や環境の異なる日本近海の5地点の深海底（757～5552m）のいずれでも、微生物により分解されることを、世界で初めて明らかにした。
▶生分解性プラスチックを分解する新たな分解微生物を深海から多数発見し、それらが世界中のさまざまな海底堆積物に存在することも明らかにした。
▶分解が実証された生分解性プラスチックは、世界中のいずれの海域においても分解されると考えられ、世界的なプラスチック海洋汚染問題の解決に貢献すると期待される。
有人潜水調査船「しんかい6500」（左）により生分解性プラスチックを深海底に設置している様子（右）
海洋研究開発機構、群馬大学、製品評価技術基盤機構、産業技術総合研究所、日本バイオプラスチック協会は、様々な生分解性プラスチック（注1）（ポリ乳酸（注2）を除く）が、神奈川県の三崎沖（水深757m）、静岡県の初島沖（水深855m）、伊豆小笠原島弧海底火山付近の明神海丘（水深1292m）、黒潮続流域の深海平原（水深5503m）、日本最東端の南鳥島沖（水深5552m）の全ての深海（注3）で、微生物により分解されることを世界で初めて明らかにした。
生分解性プラスチック表面には無数の微生物がびっしりと付着し、時間と共にサンプル表面に粗い凸凹ができて、生分解が進行する様子が観察された（図1）。深海における生分解速度は、水深が深くなるにつれて遅くなるものの、全ての深海底で生分解されることも確認された。水深約1000mの深海底では、本研究で用いた生分解性プラスチックで作製したレジ袋は、3週間～2カ月間で生分解されることも計算により推定された。
今回、菌叢解析（16S rRNA遺伝子アンプリコンシーケンシング（注4））およびメタゲノム解析（注5）により、深海から生分解性プラスチックを分解できる新たな分解微生物を多数発見することにも成功した。さらに、発見した分解微生物は、世界中のさまざまな海底堆積物（注6）にも生息していることが明らかになり、分解が実証された生分解性プラスチックは、世界中のいずれの深海でも分解されると考えられる。
今回の研究成果により、将来の海洋プラスチック汚染の抑制に貢献する優れた素材として、生分解性プラスチックの研究開発の進展が期待される。
ない、この研究成果は、国際科学専門誌「Nature Communications」オンライン版（日本時間2024年1月26日）に掲載された。
図1 深海における生分解性プラスチックの分解微生物による生分解
有人潜水調査船「しんかい6500」により深海底に設置して3カ月後の生分解性プラスチックサンプルには、マリンスノー（注7）が堆積している様子が観察された。サンプル表面に付着した無数の微生物の作用により、サンプル表面にクレーターが形成するように生分解が進行することが明らかになった。
研究背景
現在、世界中で年間約4億トンのプラスチックが生産され、毎年約800万トンのプラスチックごみが海洋に流出していると報告されている（Science 347, 768 (2015)）。普段使っているポリエチレンやポリプロピレンに代表される汎用プラスチック（注8）は、山、川、湖、海のいずれの環境においても分解しないプラスチックであり、現在、あらゆる環境下で微生物の働きにより二酸化炭素と水にまで完全に分解される「生分解性プラスチック」の開発が望まれている。
これまでポリ乳酸や微生物産生ポリエステル（注9）などを始めとする多くの生分解性プラスチックが開発され、コンポスト（注10）での生分解性および土壌、河川、湖、浅海域などにおける環境生分解性の評価が行われてきた。しかしながら、海洋プラスチックごみが最終的に行き着く深海環境において、生分解性プラスチックが本当に生分解されるのか、生分解性プラスチックを分解できる微生物が深海に存在しているのかについては、これまで誰も証明してこなかった。
研究内容
本研究では、有人潜水調査船「しんかい6500」（注11）とフリーフォール型深海探査機「江戸っ子1号」（注12）を用いて、生分解性プラスチックと汎用プラスチックを深海に3カ月～14カ月間設置し、それらサンプルの重量や形状の変化、表面に付着した微生物の解析を行った（図2(a)）。生分解性プラスチックとしては、微生物産生ポリエステル（PHA）やポリ乳酸を始めとする生分解性ポリエステルとセルロースアセテートを始めとする多糖類エステル誘導体（注13）を検討した。同時に、浮遊プラスチックごみが多い東京湾に面した海洋研究開発機構の岸壁（神奈川県横須賀市、水深約5m）にも同様のサンプルを設置し、生分解速度の比較も行った。
深海に設置したサンプルを3カ月～14カ月後に引き上げ、フィルムや射出成形体の重量と厚みの変化、表面に付着した分解微生物の解析を行った。その結果、汎用プラスチックとポリ乳酸は全く分解されないのに対し、ポリ乳酸を除く他の生分解性ポリエステルと多糖類エステル誘導体はいずれの深海底でも分解されることが分かった。
深海と岸壁における生分解速度（µg/cm2/day）を比較すると、岸壁の分解速度に対して、水深1000mの深海では5分の1から10分の1、水深5000mの深海では約20分の1であった（図2(b)）。この生分解速度の低下は、水深が深くなることによる水圧や水温などの環境変化に加え、微生物の存在量や多様性が減少するために引き起こされると考えられる。今回実験に用いた生分解性プラスチックの1つである微生物産生ポリエステルでレジ袋（一般的な厚さ15µm）を作製したとして、初島沖（水深855m）での分解速度を用いて深海における分解期間を計算すると、約3週間から2カ月間で分解されると予想された （図2(c)）。
図2 深海における生分解速度と生分解性プラスチックで作製したレジ袋の深海分解推定期間
走査型電子顕微鏡を用いて深海に設置したプラスチック表面の様子を観察したところ、汎用プラスチックとポリ乳酸のサンプル表面にはほとんど微生物が付着していなかったのに対し、生分解性プラスチック表面には多数の微生物がびっしりと付着する様子が観察された（図1）。付着した微生物の菌叢解析（注14）の結果、深海設置から数カ月は好気的な微生物が付着し、時間と共に嫌気的な微生物へと菌叢が変化することも分かった（図3）。これはサンプル表面に時間と共にマリンスノーが堆積し、好気的条件から嫌気的条件（注15）へ変化したことが原因と考えられる。サンプル直下の海底堆積物中に生息する微生物の菌叢解析を行ったところ、嫌気的条件になった状態のサンプル表面の菌叢とほとんど同じであった。
サンプル表面に付着した微生物の菌叢解析およびメタゲノム解析を行い、生分解性プラスチックを分解する微生物産生ポリエステル（PHA）分解酵素（注16）や、ポリエステラーゼ（注17）、クチナーゼ（注18）の遺伝子の塩基配列を有する新たな微生物を6種類発見した。発見した微生物は世界中の海底堆積物に存在することが分かり、今回分解が実証された生分解性プラスチックは日本近海のみならず、世界中の海域で生分解されると考えられる。
図3 生分解性プラスチック表面と海底堆積物に生息する微生物の菌叢解析と新たに発見した分解微生物の堆積物中の全球分布
初島沖の深海底に4カ月設置したフィルム表面には好気的な微生物（青や緑色）のみ存在したが、14カ月後には嫌気的な微生物（ピンク色）が支配的になっていくことが分かった。また、14カ月後のフィルム表面の微生物菌叢は、海底堆積物中の菌叢とほぼ同じであった。新たに発見した微生物産生ポリエステル（PHA）分解菌が世界中の海底堆積物中に存在することも分かり、PHAは世界中の海で生分解されると考えられる。
今後の展望
本研究により、海洋プラスチックごみが最終的に行き着くと考えられている深海底でも、生分解性プラスチックは微生物により分解されることが証明された。プラスチック製品は可能な限り回収して、リサイクルすることが必要。しかし、全てのプラスチックを回収することは不可能であり、環境中に流出するものも多々ある。したがって、海洋流出の避けられない製品などには、生分解性プラスチックを適切に使用することが必要不可欠であり、生分解性プラスチックは、将来の海洋プラスチック汚染の抑制に貢献する優れた素材であると言える。今後は、使用中は優れた物性を持続的に発揮、使用後に、仮に海洋に流出したら分解が始まるとともに、可能な限り速やかに分解する海洋分解開始機能を有する高性能な海洋生分解性プラスチックの開発が期待される。
論文情報
雑誌名：Nature Communications（2024年1月26日オンライン版公開）
題 名：Microbial Decomposition of Biodegradable Plastics on the Deep-sea Floor
著者名：T. Omura, N. Isobe, T. Miura, S. Ishii, M. Mori, Y. Ishitani, S. Kimura, K. Hidaka, K. Komiyama, M. Suzuki, K. Kasuya, H. Nomaki, R. Nakajima, M. Tsuchiya, S. Kawagucci, H. Mori, A. Nakayama, M. Kunioka, K. Kamino and T. Iwata*（*責任著者）
DOI: 10.1038/s41467-023-44368-8
URL: https://www.nature.com/articles/s41467-023-44368-8
著 者：T. Omura, N. Isobe, T. Miura, S. Ishii, M. Mori, Y Ishitani, S. Kimura, K. Hidaka, K. Komiyama, M. Suzuki, K. Kasuya , H. Nomaki, R. Nakajima, M. Tsuchiya, S. Kawagucci, H. Mori, A. Nakayama, M. Kunioka, K. Kamino and T. Iwata*（＊責任著者）
発表者・研究者等情報
＜東京大学 大学院農学生命科学研究科 生物材料科学専攻＞岩田忠久教授、大村 拓（研究当時）博士課程、込山活哉（研究当時）修士課程
＜東京大学 大学院農学生命科学研究科 技術基盤センター＞木村 聡技術専門職員
＜海洋研究開発機構＞磯部紀之副主任研究員、石井俊一副主任研究員、石谷佳之特任研究員、野牧秀隆上席研究員、中嶋亮太主任研究員、土屋正史副主任研究員、川口慎介主任研究員
＜群馬大学 大学院理工学府分子科学部門＞粕谷健一教授（兼同大学食健康科学教育研究センター センター長）
＜群馬大学 食健康科学教育研究センター＞鈴木美和助教
＜製品評価技術基盤機構＞三浦隆匡主任、森 美穂子（研究当時）専門官、日高皓平主任、紙野 圭課長
＜産業技術総合研究所＞中山敦好主任研究員
＜日本バイオプラスチック協会＞森 浩之顧問
研究助成
本研究は、下記の支援により実施された。
NEDO委託事業「NEDO先導研究プログラム／エネルギー・環境新技術先導研究プログラム／様々な生分解性プラスチックの海洋分解性評価（課題番号：P14004）」（研究代表者：東京大学・岩田忠久、海洋研究開発機構・磯部紀之、研究期間：2019年度～2020年度）
内閣府・戦略的イノベーション創造プログラム（SIP）「革新的深海資源調査技術」「江戸っ子1号」を利用した深海底での生分解プラスチック分解試験（研究体制：日本バイオプラスチック協会、海洋研究開発機構、東京大学、産業技術総合研究所、研究期間：2019年度～2021年度）
NEDO委託事業「海洋生分解性プラスチックの社会実装に向けた技術開発事業／海洋生分解性に係る評価手法の確立（課題番号：P20008）」（研究代表者：産業技術総合研究所・国岡正雄、東京大学・岩田忠久、製品評価技術基盤機構・紙野圭、研究期間：2020年度～2024年度）
NEDO委託事業「ムーンショット型研究開発事業／地球環境再生に向けた持続可能な資源循環を実現／生分解開始スイッチ機能を有する海洋分解性プラスチックの研究開発（課題番号：JPNP18016）」（研究代表者：群馬大学・粕谷健一、東京大学・岩田忠久、海洋研究開発機構・野牧秀隆、研究期間：2020年度～2024年度）
科学研究費補助金「基盤研究A（課題番号：19H00908）」（研究代表者：岩田忠久、研究期間2019年度～2023年度）
大型放射光SPring-8、フロンティアソフトマテリアルFSBL「課題番号：2019B7270, 2020A7223, 2021A7222」（研究代表者：岩田忠久、研究期間2019年度～2021年度）
補足説明
深海設置場所
・神奈川県三崎沖（水深757m）：大型のプラスチックごみが多く集積している深海底
・静岡県初島沖（水深855m）：マイクロプラスチックを取り込んだ深海生物が報告されている深海底
・伊豆小笠原島弧海底火山付近の明神海丘（水深1292m）：海底火山で水温やpHなどの環境が特殊な深海底
・黒潮続流域の深海平原（水深5503m）：海底堆積物にマイクロプラスチックが多く集積している海域
・日本最東端の南鳥島沖（水深5,552m）：人間活動や海流によるマイクロプラスチックの集積などの影響が少ない深海底
用語解説
注1）生分解性プラスチック：自然環境中に存在する微生物が分泌する分解酵素により、水に可溶な低分子化合物にまで分解されたのち微生物体内に取り込まれ、最終的に二酸化炭素と水にまで完全に分解されるプラスチック。
注2）ポリ乳酸：乳酸がエステル結合により重合したポリマー。生分解性プラスチックとして位置付けられるが、工業用コンポスト条件下でのみ分解され、一般の土壌や河川水などでは分解しない。
注3）深海：一般に水深200mより深い海のことで、海洋全体の95％を占めている。
注4）16S rRNA遺伝子アンプリコンシーケンシング：バイオフィルム中の微生物の全DNAを回収し、生命が持つ普遍的な遺伝子である16S rRNA遺伝子の配列を網羅的に増幅・解読することにより、微生物の菌叢を解析する手法である。培養を介さないため、より現場の微生物叢を正確に見積もることが可能となる。
注5）メタゲノム解析：バイオフィルム中の微生物の全DNAを回収し、全DNAを網羅的に解読して微生物群集のゲノム配列を解析する手法である。16S rRNA解析とは異なり、全ゲノム配列を対象とするため、微生物群集の中で優占している微生物については、その微生物が有する機能・代謝遺伝子の解析が可能である。
注6）海底堆積物：海の底に、鉱物などの無機粒子、生物の遺骸、糞、などが溜まってできた、細かい粒子の集まり。海域や海底地形によって、その組成や存在する微生物の種類が異なる。
注7）マリンスノー：海洋表層から深海底へと沈降する粒子状有機物のこと。植物プランクトンや動物プランクトンの遺骸、糞、鉱物粒子、バクテリアなどからなる。沈んでいく様子が雪が降っているように見えるため、マリンスノーと呼ばれる。
注8）汎用プラスチック：ポリエチレン、ポリプロピレン、ポリスチレンなどプラスチックの約8割を占める熱可塑性プラスチックで、生活用品や工業製品などに大量に使われている。基本的に、石油から合成され、生分解性は有していない。
注9）微生物産生ポリエステル：糖や植物油を原料として、微生物体内で生合成されるエステル結合を持ったポリマー。ポリ[(R)-ヒドロキシブチレート]やその共重合体の総称（PHA）で、自然環境中の他の微生物が分泌する分解酵素によって、二酸化炭素と水にまで完全に生分解される。
注10）コンポスト：生ごみなどをたい肥化する施設。家庭用コンポストと工業用コンポストがあり、ポリ乳酸は、温度が60℃以上、湿度が60％以上の工業用コンポストでのみ分解する。
注11）しんかい6500：海洋研究開発機構が保有する水深6,500 mの深さまで潜ることができる有人潜水調査船。
注12）江戸っ子1号：東京下町工場を中心とするプロジェクトで開発されたフリーフォール型深海探査機。観測目的に応じた派生型が開発されており、本研究では1年間の長期観測が可能な「江戸っ子1号365型」が使用された。
注13）多糖類エステル誘導体：セルロース、デンプン、パラミロンなど、単糖がグリコシド結合で長くつながったものを多糖類と呼ぶ。多糖類の持つ水酸基をエステル基で置換したポリマーをエステル誘導体と呼び、熱成形可能なプラスチックにしたもの。
注14）微生物の菌叢解析：バイオフィルムなどの微生物群集中に含まれる微生物の種類や存在量を網羅的に解析することであり、微生物群集の組成を評価することができる。 通常、16S rRNA遺伝子をPCR増幅して解析するが、メタゲノムから解析することもできる。
注15）好気的条件と嫌気的条件：酸素が存在する条件と酸素が存在しない条件。深海底を流れる深層水には、酸素が溶け込んでおり、海底付近は好気的条件となっている。しかし、マリンスノーの堆積により、プラスチックごみが堆積物中に埋もれていくにつれて嫌気的条件になる。
注16）微生物産生ポリエステル分解酵素：微生物産生ポリエステルを分解する酵素。別名、ポリヒドロキシアルカノエート（PHA）分解酵素とも呼ぶ。
注17）ポリエステラーゼ：生分解性ポリエステルのエステル結合を水との反応で切断する加水分解酵素。
注18）クチナーゼ：エステラーゼの一種で、植物のクチクラを構成するクチンを分解する酵素。クチンと構造が似ている生分解性ポリエステルを分解することができる。
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